NGS를위한 시퀀싱 접근법

1996 년 스톡홀름 왕립 공과 대학의 Pål Nyrén과 그의 학생 Mostafa Ronaghi는 파이로 시퀀싱 작업을 발표했습니다. Pyrosequencing은 일련의 효소 반응을 사용하여 무기 피로 인산염을 가시 광선으로 비례 적으로 변환하여 무기 피로 인산염의 방출을 측정하는 전기 영동이 아닌 생물 발광 작업입니다. 변형 된 뉴클레오티드를 사용하여 DNA 합성 을 종료하는 다른 시퀀싱 접근 방식과 달리, 파이로 시퀀싱 작업 은 제한된 양의 dNTP를 단일 첨가하여 DNA 중합 효소를 조작 합니다. 상보적인 dNTP를 통합하면 DNA 중합 효소가 프라이머를 확장하고 일시 중지합니다.. DNA 디스 펜싱 사이클에서 다음 보완 dNTP를 추가 한 후 합성이 다시 시작됩니다. 광원 피크의 조절 및 강도는 기본 DNA 연결 을 구별하는 플로우 그램으로 기록됩니다 .

이미지 155A | PacBio SMRT 기술과 Oxford Nanopore는 변경되지 않은 DNA 를 사용 하여 메틸화를 경험할 수 있습니다. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) Page URL 출처: Wikimedia Commons

저자 : Milos Pawlowski

참고 문헌:

분자 생물학 기술 I

분자 생물학 II의 기술