솔루션 내 캡처

마이크로 어레이는 표면에 고정 된 관심 영역을 타일링하기 위해 인간 게놈의 서열을 가진 단일 가닥 올리고 뉴클레오티드를 포함합니다. 게놈 DNA 는 전단되어 이중 가닥 단편을 형성합니다. 단편은 최종 수리를 거쳐 무딘 끝을 생성하고 범용 프라이밍 시퀀스가있는 어댑터가 추가됩니다. 이러한 단편은 microarray 의 올리고에 혼성화됩니다. 혼성화되지 않은 단편은 세척되고 원하는 단편이 용출됩니다. 단편은 PCR 를 사용하여 증폭됩니다 .

Roche NimbleGen은 최초의 DGS 기술을 채택하여 차세대 시퀀싱에 적용했습니다. 그들은 약 18 만 개의 코딩 엑손을 캡처하기 위해 결합 Capture Human Exome 2.1M Array를 개발했습니다. 이 작업은 PCR 기반 방법에 비해 시간을 절약하고 비용 효율적 입니다. Agilent Capture Array 및 비교 게놈 hybridization 어레이는 목적 시퀀스의 하이브리드 캡처에 사용할 수있는 또 다른 방법입니다. 이 기술의 한계는 상대적으로 많은 양의 DNA 와 같은 값 비싼 하드웨어에 대한 필요성을 포함합니다 .

이미지 163A | Exome sequencing 워크 플로: 2 부 | SarahKusala / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/3.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Exome_Sequencing_workflow_1b.png) Wikimedia Commons

저자 : Yavor Mendel

참고 문헌:

분자 생물학 기술 I

분자 생물학 III의 기술