DNA 콜로니 생성 (브리지 증폭)

정방향 및 역방향 프라이머는 플로우 셀의 슬라이드에 고밀도로 공유 결합됩니다. 지지체의 템플릿에 대한 프라이머의 비율은 증폭 된 클러스터의 표면 밀도를 정의합니다. 플로우 셀은 중합 효소 기반 확장을위한 시약에 노출되며, 연결 단편의 자유 / 원위 말단이 표면의 보완 올리고에 "브리지"될 때 프라이밍이 발생합니다. 반복 된 변성 및 확장은 DNA 의 국소 증폭을 초래합니다 DNA .플로우 셀 표면에 걸쳐 수백만 개의 개별 위치에있는 조각. 고체상 증폭은 공간적으로 분리 된 1 억 ~ 2 억 개의 템플릿 클러스터를 생성하여 범용 시퀀싱 프라이머가 혼성화되어 시퀀싱 반응을 시작하는 자유 말단을 제공합니다. 이 기술은 1997 년 Glaxo-Welcome의 Geneva Biomedical Research Institute (GBRI)에서 Pascal Mayer, Eric Kawashima 및 Laurent Farinelli가 특허를 신청했으며 1998 년에 처음으로 공개되었습니다. 1994 년 Adams와 Kron은 1997 년 Church와 Mitra에 의해 클론 증폭을 위해 채택 된 "브리지 증폭"이라는 유사하지만 비 클론 표면 증폭 작업에 대한 특허.

이미지 155A | PacBio SMRT 기술과 Oxford Nanopore는 변경되지 않은 DNA 를 사용 하여 메틸화를 경험할 수 있습니다. | Nivretta Thatra / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/legalcode) | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:3rd_gen_Epigenetics.png) Page URL 출처: Wikimedia Commons

저자 : Yavor Mendel

참고 문헌:

분자 생물학 기술 I

분자 생물학 III의 기술