고려 사항

전체 게놈 증폭 및 시퀀싱 전에 개별 세포를 분리하는 몇 가지 방법이 있습니다. 형광 활성화 세포 분류( FACS)는 널리 사용되는 무승부입니다. 또한 개별 세포는 미세 조작, 예를 들어 연속 희석 또는 패치 피펫 또는 나노 튜브를 사용하여 단일 세포를 수집하여 수집 할 수 있습니다. 미세 조작의 장점은 쉽고 저렴하지만 힘들고 현미경으로 세포 유형을 잘못 식별하기 쉽습니다. 레이저 캡처 미세 해부 (LCM)는 또한 단일 세포를 수집하는 데 사용할 수 있습니다. LCM이 조직 내에서 샘플링 된 세포의 공간적 위치에 대한 지식을 보존 함에도 불구하고, 인접 세포에서 물질을 수집하지 않고는 독립 체 단일 세포를 포착하기가 어렵습니다. 또한 단일 세포 분리를위한 고 처리량 방법에는 미세 유체가 포함됩니다. 둘 다 FACS 미세 유체는 정확하고 자동적이며 편향되지 않은 시료를 분리 할 수 ​​있습니다. 그러나 두 방법 모두 먼저 미세 환경에서 세포를 분리해야하므로 RNA 형태의 발현 검사 에서 전사 프로파일에 교란이 발생 합니다.

이미지 261A | 단일 셀 RNA 시퀀싱 워크 플로우 | Yijyechern / Attribution-Share Alike 3.0 Unported | Page URL : (https://commons.wikimedia.org/wiki/File:RNA-Seq_workflow-5.pdf) from Wikimedia Commons

저자 : Yavor Mendel

참고 문헌:

분자 생물학 기술 II

분자 생물학의 기술 VI